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    在荧光自准直仪下观察尺寸小于光学极限物体 由于观察细胞影像必须透过自准直仪等硬体,一旦讯号透过光学系统,必然会有讯号遭到扭曲或损失, 此过程称为convolution。若能知道点光源在光学系统下被扭曲的状况,便可用数学方式将模糊的xyz讯号还原并组成完整影像, 此过程称为Deconvolution。 至于影像被自准直仪convolution成什么样子呢?只要在荧光自准直仪下观察尺寸小于光学极限的荧光珠子(约50~200 nm), 则每颗珠子可视为一点光源,其经过自准直仪发散后得到的影像称为PSF (point spread function)。PSF是一个3D函数, 描述的是点光源在xyz轴上被模糊的情形,而一个生物样品的讯号又可视为许多个点光源的PSF的集合。 根据上述,以PSF为基础,将影像进行Deconvolution后,不仅能增加讯号强度,也能改善讯杂比、提高对比及解析度。 目前市面上已有以Deconvolution为基础的高阶影像系统,除了使用Deconvolution技术,系统也可搭配其他硬体, 包含使用CCD快速的撷取影像、能减少光对活细胞样品的伤害的光源、精準的全自动化xyz载物台等,可以简易得到清晰的活细胞影像。 这些先进的影像系统,还可以全自动进行多色观察、时序拍摄、自动对焦、多点拍摄、细胞追踪, 亦可依需求加装雷射进行photoactivation、FRET、FRAP、TIRF等实验,为活细胞影像研究领域提供了完整且便利的先进工具。


     
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