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普通荧光自准直仪下怎样观测EGFP-----新闻标题
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普通荧光自准直仪下怎样观测EGFP?
有的实验室可能只有普通的荧光自准直仪,没有倒置的,那么怎样利用普通荧光自准直仪也可以观测EGFP的基因转染入HepG2细胞呢?

1)可以考虑载体表达完毕后(一般是转染结束后24-72小时),将细胞固定,染色之,并加盖封片剂,在细胞顶面加上盖玻片制成可长期保存的细胞样本。
这样即可用于正置荧光自准直仪的观察。且盖玻片厚度小,甚至可以用工作距离很小的物镜(如100x oil)进行观察。

推荐大家使用35mm培养皿,比较容易操作。在制片的时候还可以吧皿壁完全去除,这样就能同时满足正置、倒置自准直仪的观察需要。
2)还有一种比较快捷的办法,只要将片子用PBS洗三遍,然后粘在载玻片上,上面用50%PBS+50%甘油封片,就可以了,在荧光自准直仪下激发可看,记得不要调错激发光

 

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